Юнимед белок в моче
Содержание статьи
абор реагентов для определения белка в моче
Кто вы?
Все нашли?
В каталоге медицинского оборудования Юнимед вы можете подобрать и купить набор реагентов для определения белка в моче в Москве с доставкой. Более 6 позиций от 550 рублей — фотографии, подробное описание и характеристики.
Набор реагентов для определения белка в моче «Юни-Тест-БМ»
(метод пирогаллоловый красный)
Производитель: ООО «Эйлитон», г. Москва, Россия
Артикул: БР26001/К
Набор реагентов «Юни-Тест-БМ» содержит все необходимое для работы |
Набор реагентов «Юни-Тест-БМ» предназначен для количественного определения белка в моче (диагностика протеинурии) и спинномозговой жидкости современным, высокочувствительным методом – пирогаллоловый красный. Это метод, точность измерений и правильность полученных результатов, которым соответствует Приказу МЗ РФ №45 от 07.02.2000 и ОСТ 91500.13.0001-2003.
Более 2000 лабораторий на территории России используют этот метод в своей практике. Высокая и однородная чувствительность данного метода к различным фракциям белка, реализованная в наборе реагентов «Юни-Тест-БМ», дает возможность определять микропротеинурию (от 0, 05 г/л).
В состав набора входит:
- Реагент – раствор красителя пирогаллолового красного и молибдата натрия в сукцинатном буфере; 1 флакон, 500 мл
- Калибратор 1 г/л – калибровочный раствор общего белка 1 г/л; 1 флакон, 5 мл
- Калибратор 0,2 г/л – калибровочный раствор общего белка 0,2 г/л; 1 флакон, 5 мл
Особенности набора реагентов «Юни-Тест-БМ»:
- Линейный диапазон определения общего белка до 4 г/л, что позволяет определять общий белок в моче в диапазоне от 0, 05 г/л до 4 г/л без дополнительных разведений
- Для работы используется малый объем биологического материала — 20 мкл
- Время инкубации проб сокращено до 10 мин при температуре 18-25оС или 37оС
- Срок годности калибратора после вскрытия флакона — до 3 месяцев при 4-8оС
- Возможность использования на фотометрах любого типа
- Все компоненты набора готовы к использованию
[02.04.2012] Новые публикации
Уважаемые коллеги!
Мы рады сообщить Вам, что во втором выпуске журнала «Справочник Заведующего КДЛ», Вы можете ознакомиться со статьей А.Н. Шибанова «Определение референтного интервала концентрации белка в моче»
Читать дальше
[08.07.2011] В гостеприимном Ставрополье
На прошедшей неделе генеральный директор А/О Юнимед посетил один из самых популярных курортов Кавказских Минеральных вод — г. Ессентуки. Подробнее о визите Александра Николаевича читайте в нашем репортаже.
Читать дальше
[12.07.2010] Usus est optimus magister
Из этого репортажа Вы узнаете о том, почему специалисты компании Юнимед на два дня сменили место работы на клинико-диагностическую лабораторию крупнейшего стационара города Москвы, и что из этого получилось.
Читать дальше
[19.04.2010] Поделитесь Вашим мнением!
Ратуете за внедрение прогрессивных методик в практику лабораторной диагностики? — Нам с Вами по пути!
Вам ближе проверенные временем консервативные методики? — Нам интересна Ваша точка зрения!
Источник
Белок в моче – методы определения и границы нормы (современное состояние проблемы) — компания Юнимед в Москве
ЮНИТЕКА:
Анализ мочи:
26.02.2009
Куриляк О.А., к.б.н.
В норме белок выделяется с мочой в относительно небольшом количестве, обычно не более 100–150 мг/сут.
Суточный диурез у здорового человека составляет 1000–1500 мл/сут; таким образом, концентрация белка в физиологических условиях составляет 8–10 мг/дл (0,08-0,1 г/л).
Общий белок мочи представлен тремя основными фракциями – альбуминами, мукопротеинами и глобулинами.
Альбумин мочи – это та часть альбумина сыворотки крови, которая была профильтрована в клубочках и не была реабсорбирована в почечных канальцах; в норме экскреция альбумина в моче составляет менее 30 мг/сут. Иным главным источником белка в моче служат почечные канальцы, особенно дистальная часть канальцев. Эти канальцы секретируют две третьих общего количества мочевого белка; из этого количества примерно 50% представлено гликопротеидом Тамма‑Хорсфалла, который секретируется эпителием дистальных канальцев и играет важную роль в формировании мочевых камней. Иные белки присутствуют в моче в незначительном количестве и происходят из профильтровавшихся через почечный фильтр низкомолекулярных белков плазмы, которые не реабсорбируются в почечных канальцах, микроглобулинов из эпителия почечных канальцев (RTE), а также простатического и влагалищного отделяемого.
Протеинурия, то есть увеличение содержания белка в моче – один из наиболее значимых симптомов, отражающий поражение почек. Однако и целый ряд других состояний также может сопровождаться протеинурией. Поэтому различают две основные группы протеинурий: почечную (истинную) и внепочечную (ложную) протеинурию.
При почечной протеинурии белок проникает в мочу непосредственно из крови вследствие повышения проницаемости гломерулярного фильтра. Почечная протеинурия часто встречается при гломерулонефрите, нефрозе, пиелонефрите, нефросклерозе, амилоидозе почек, различных формах нефропатий, например нефропатии беременных, лихорадочных состояниях, гипертонической болезни и т.д. Протеинурия может обнаруживаться и у здоровых людей после тяжелых физических нагрузок, переохлаждения, психологического стресса. У новорожденных в первые недели жизни наблюдается физиологическая протеинурия, а при астении у детей и подростков в сочетании с быстрым ростом в возрасте 7-18 лет возможна ортостатическая протеинурия (в вертикальном положении тела).
При ложной (внепочечной) протеинурии источником белка в моче является примесь лейкоцитов, эритроцитов, клеток эпителия мочевых путей уротелия. Распад этих элементов, особенно резко выраженный при щелочной реакции мочи, приводит к попаданию белка в мочу, уже прошедшую почечный фильтр. Особенно высокую степень ложной протеинурии дает примесь крови в моче, при профузной гематурии она может достигать 30 г/л и более. Заболевания, которые могут сопровождаться внепочечной протеинурией — мочекаменная болезнь, туберкулез почки, опухоли почки или мочевых путей, циститы, пиелиты, простатиты, уретриты, вульвовагиниты.
Клиническая классификация включает легкую протеинурию (менее 0,5 г/сут.), умеренную (от 0,5 до 4 г/сут.), или тяжелую (более 4 г/сут.).
У большинства пациентов с заболеваниями почек, такими, как острый гломерулонефрит или пиелонефрит выявляют умеренную протеинурию, но больные с нефротическим синдромом обычно выделяют с мочой более 4 г белка ежедневно.
Для количественного определения белка применяется широкий спектр методов, в частности, унифицированный метод Брандберга-Робертса-Стольникова, биуретовый метод, метод с применением сульфосалициловой кислоты, методы с использованием красителя кумасси синий, красителя пирогаллоловый красный и др.
Использование различных методов определения белка в моче привело к тому, что в трактовке границ нормы содержания белка в моче возникла серьезная путаница. Поскольку наиболее часто в лабораториях используются 2 метода – с сульфосалициловой кислотой и красителем пирогаллоловый красный, рассмотрим проблему корректности границ норм именно для них. С позиции сульфосалицилового метода в нормальной моче содержание белка не должно превышать 0,03 г/л, с позиции же пирогаллолового – 0,1 г/л! Различия троекратные!!!
Низкие значения нормы концентрации белков в моче при использовании сульфосалицилового обусловлены следующими моментами:
- калибровочная кривая строится по водному раствору альбумина. Моча по своему составу очень сильно отличается от воды: рН, соли, низкомолекулярные соединения (креатинин, мочевина и др). Вследствие этого по данным Альтшулера, Ракова и Ткачева ошибка определения белка в моче может быть 3-х кратной и более! Т.е. корректные результаты определения могут быть получены только в тех случаях, когда моча имеет очень низкий удельный вес и по своему составу и рН приближается к воде;
- более высокая чувствительность сульфосалицилового метода к альбумину в сравнении с другими белками (в то время, как было упомянуто выше, альбумин в нормальных образцах мочи составляет не более 30% от общего белка мочи);
- если pH мочи сдвинута в щелочную сторону, происходит нейтрализация сульфосалициловой кислоты, что так же является причиной занижения результатов определения белка;
- скорость седиментации преципитатов подвержена значительной вариации — при невысоких концентрациях белка преципитация замедлена, и ранняя остановка реакции приводит к занижению результата;
- скорость реакции преципитации существенно зависит от перемешивания реакционной смеси. При высоких концентрациях белка активное встряхивание пробирки может приводить к образованию крупных хлопьев и их быстрому осаждению.
Все выше перечисленные особенности метода и приводят к значительному занижению определяемой в моче концентрации белка. При этом степень занижения сильно зависит от состава конкретной пробы мочи. Поскольку метод сульфосалициловой кислоты дает заниженные значения концентрации белка то и граница нормы для этого метода 0,03 г/л тоже занижена примерно в три раза в сравнении с данными, которые приводятся в зарубежных справочниках по клинической лабораторной диагностике.
Подавляющее большинство лабораторий западных стран отказались от применения сульфосалицилового метода для определения концентрации белка в моче и активно используют для этих целей пирогаллоловый метод. Пирогаллоловый метод определения концентрации белка в моче и других биологических жидкостях основан на фотометрическом принципе измерения оптической плотности окрашенного комплекса, образующегося при взаимодействии молекул белка с молекулами комплекса красителя пирогаллоловый красный и молибдата натрия (Pyrogallol Red–Molybdate complex).
Почему пирогаллоловый метод позволяет получать более точные результаты измерения концентрации белка в моче? Во-первых, за счет большей кратности разведения пробы мочи в реакционной смеси. Если в сульфосалициловом методе отношение проба мочи/реагент составляет 1/3, то в пирогаллоловом методе оно может быть в пределах от 1/12,5 до 1/60 в зависимости от варианта методики, что значительно уменьшает влияние состава мочи на результат измерения. Во-вторых, реакция протекает в сукцинатном буфере, то есть при стабильном рН. И, наконец, сам принцип метода, можно сказать, более «прозрачный». Молибдат натрия и краситель пирогаллоловый красный образуют комплекс с молекулой белка. Это приводит к тому, что молекулы красителя в свободном состоянии не поглощающие свет на длине волны 600 нм в комплексе с белком свет поглощают. Таким образом, мы как бы метим каждую молекулу белка красителем и в результате получаем, что изменение оптической плотности реакционной смеси на длине волны 600 нм четко коррелирует с концентрацией белка в моче. Причем, поскольку сродство пирогаллолового красного к разным фракциям белка практически одинаковое, метод позволяет определять общий белок мочи. Поэтому граница нормальных значений концентрации белка в моче составляет 0,1 г/л (она и указана во всех современных западных руководствах по клинико-лабораторной диагностике, в том числе и в «Клиническом руководстве по лабораторным тестам», под ред. Н. Тица). Сравнительные характеристики пирогаллолового и сульфосалицилового методов определения белка в моче представлены в Таблице 1.
В заключение, хотелось бы еще раз акцентировать внимание на том факте, что при переходе лаборатории с сульфосалицилового метода определения белка в моче на пирогаллоловый метод граница нормальных значений существенно повышается (с 0,03 г/л до 0,1г/л!). Об этом сотрудники лаборатории должны непременно поставить в известность врачей-клиницистов, т.к. при сложившейся ситуации диагноз протеинурия может быть поставлен только в том случае, когда содержание белка в моче превышает 0,1 г/л.
Список литературы.
- Альтшулер Б.Ю., Раков С.С., Ткачев Г.А. // Вопр. мед. химии. – 2001. – № 4. – C.426-438.
- Ким Ю.В., Потехин О.Е., Токар М.И., Шибанов А.Н. // Лаб. мед. – 2003. – № 6. – C.94-98.
- Клиническое руководство по лабораторным тестам, под ред. Н. Тица.- М.- Юнимед-пресс.-2003.- 942 с.
- Козлов А.В., Слепышева В.В. Методы определения белка в моче: возможности и перспективы // Сборник трудов VII ежегод. СПб нефрол. семинара. – СПб: ТНА. – 1999. – C.17-28.
- Пупкова В.И., Пикалов И.В., Хрыкина Е.Н., Харьковский А.В. // Новости «Вектор-Бест». – 2003. – № 4 (30).
- Chambers R.E., Bullock D.G., Whicher J.T. // Ann. Clin. Biochem. – 1991. – Vol. 28 (Pt 5). – P.467-473.
- Clinical Laboratury Medicine. Ed. by Kenneth D. McClatchey. – 2nd ed.-2001.- 1993p.
- Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // Clin. Biochem. – 2000. – Vol. 33. – P.487-494.
- Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Composition and device for urinary protein assay and method of using the same // ПатентСША № 5326707. – 1994.
- Kaplan I.V., Levinson S.S. // Clin. Chem. – 1999. – Vol. 45. – P.417-419.
- Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. of Med. – 2003. – Vol. 70 (6). – P.535-547.
- Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Low P, Potter JM. // Clin. Chem. – 2001. – Vol. 47. – P.2183-2184.
- Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Article in French. – Ann. Biol. Clin. (Paris). – 1998. – Vol. 56 (6). – P.719-723.
- Marshall T., Williams K.M. // Clin. Chem. – 2003. – Vol. 49 (12). – P.2111-2112.
- Pugia M., Newman D.J., Lott J.A., D’Mello L., Clark L., Profitt J.A., Cast T. // Clin. Chim. Acta. – 2002. – Vol. 326 (1-2). – P.177-183.
- Ringsrud K.M., Linne J.J. Urinalysis and body fluids: A ColorText and Atlas // Mosby. – 1995. – P.52-54.
- Shepard M.D., Penberthy L.A. // Clin. Chem. – 1987. – Vol. 33. – P.792-795.
- Williams K.M., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Methods. – 2001. – Vol. 47. – P.197-207.
- Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Methods. – 2003. – Vol. 57 (1). – P.45-55.
Теги:
Источник
Определение соотношения белок/креатинин – современная альтернатива определению концентрации белка в суточной моче.
ЮНИТЕКА:
Анализ мочи:
16.05.2019
До недавнего времени определение концентрации белка в суточной моче считалось «золотым стандартом» в диагностике протеинурии. И это имело под собой очень серьезное основание. Дело в том, что качественный и количественный состав мочи в течение суток значительно изменяется, а определение белка в суточной моче позволяет нивелировать влияние величины диуреза на концентрацию белка в моче. Приведем пример: у пациента с величиной экскреции белка в 0,5г. в сутки концентрация белка в моче может варьироваться от 1 г/л (при суточном диурезе 0,5л) до 0,2г/л (при суточном диурезе в 2,5л.).
Однако, сбор суточной мочи — очень сложный процесс даже для пациентов стационара, и он практически неосуществим для детей раннего возраста и пожилых пациентов. А как быть больницам скорой помощи, в которые ургентные пациенты поступают круглосуточно, и первый анализ мочи можно выполнить только из разовой порции, полученный в момент госпитализации?
Многолетние научные исследования по поиску альтернативы суточному анализу мочи показали, что корректно оценить почечную экскрецию белка без определения объема суточного диуреза позволяет расчет соотношения белок/креатинин.
Физиологическое обоснование этого подхода следующее: у одного и того же человека в стабильных условиях экскреция креатинина с мочой — величина относительно постоянная (количество креатинина, которое образуется организмом человека в течение суток является постоянным, креатинин свободно проходит через клубочковый фильтр и не реабсорбируется в почечных канальцах, т.о., с мочой в течение суток выделяется весь образовавшийся в организме креатинин), а его концентрация в моче зависит исключительно от объема диуреза, который в свою очередь зависит от объема потребления жидкости. Аналогично величина диуреза влияет и на концентрацию белка в моче, при этом отношение белка к креатинину остается постоянным при любом объеме диуреза.
Приведем пример индивидуальных вариаций концентрации белка и креатинина в моче у одного из практически здоровых испытуемых. Утреннюю порцию мочи испытуемого исследовали в течение 7 дней. Исследования проводились с использованием аналитической системы: Анализатор белка и креатинина в моче URiСКАН-БК, набор реагентов Юни-Тест-БМ (для белка в моче) и набор реагентов Креатинин UTS (для определения креатинина в моче и сыворотке). Результаты представлены в Табл.1.
Таблица 1. Индивидуальные вариации концентрации белка и креатинина.
Дата проведения анализа | Концентрация белка в моче, г/л | Концентрация креатинина в моче, г/л | Соотношение Белок/Креатинин |
12.09. | 0,123 | 1,926 | 0,065 |
13.09. | 0,013 | 0,298 | 0,045 |
14.09. | 0,148 | 1,513 | 0,098 |
17.09. | 0,090 | 1,195 | 0,076 |
18.09. | 0,079 | 1,791 | 0,044 |
19.09. | 0,166 | 1,927 | 0,086 |
20.09. | 0,083 | 1,195 | 0,069 |
Как видно из представленных данных, разброс концентрации белка в моче более, чем 10 раз (от 0.013 до 0,166 г/л)! 13.09. испытуемый на ночь выпил 3 стакана воды, что существенно увеличило объем утреннего диуреза и концентрация белка в моче составила 0,013 г/л, а 19.09 было противоположная ситуация – жидкость перед сном не принималась, что привело к значительному концентрированию утренней порции мочи и увеличению концентрации белка почти в 13 раз (0,166 г/л). Аналогичная зависимость выявлена и для креатинина (концентрация креатинина изменилась в 6,4 раза), что свидетельствует о наличии общей причины таких существенных концентрационных вариаций исследованных аналитов. В данном случае это объем диуреза. Соотношение же белок/креатинин остается относительно постоянным – оно изменилось всего в 1.9 раза.
В многочисленных клинических исследованиях установлено, что величина протеин-креатининового соотношения в первой утренней порции мочи четко коррелирует с уровнем суточной протеинурии. Так, соотношение белок/креатинин более 3,0-3,5 г белка/г креатинина соответствует экскреции белка выше 3,0-3,5 г/сутки, менее 0,2 г белка/г креатинина – уровню ниже 0,2 г/сутки. Поэтому, во всех ныне действующих российских и зарубежных клинических рекомендациях при диагностике протеинурии рекомендовано определять соотношение общий белок/креатинин и альбумин/креатинин.
В норме значение соотношения общий белок/креатинин по разным источникам не превышает 0,15-0,2 г белка/креатинина, при тубулоинтерстициальных поражениях почек (нарушена реабсорбция) этот показатель находится в диапазоне от 0,2 г/г до 1,0 г/г, при гломерулярных заболеваниях (нарушена барьерная функция) превышает 1,0 г/г, а при тяжелой преэклампсии может достигать 5,0 г белка/г креатинина и более.
Более подробно о современных подходах к диагностике протеинурии читайте в статье: Диагностика протеинурии. В помощь практикующему врачу. А.Н. Шибанов, О.А. Куриляк
Источник