Юни тест бм белок в моче

Анализ мочи:

14.12.2008

Клинические испытания набора реагентов для определения белка в моче «Юни-Тест-БМ» проводились на 4-х клинических базах:

• Лаборатория клинической биохимии Института Клинической Кардиологии им. А.Л. Мясникова Российского Кардиологического Научно-Производственного Комплекса МЗ РФ (ИКК РКНПЛ МЗ РФ) (руководитель лаборатории – проф. Титов В.Н.);
• КДЛ Российского Научного Центра Хирургии РАМН (руководитель лаборатории – проф. Михайлов Ю.Е.);
• КДЛ НИИ Трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ (руководитель лаборатории – д.м.н. Ермакова И.П.);
• Кафедра клинической лабораторий диагностики Российской медицинской академии постдипломного образования (зав. каф. – проф. В.В. Долгов).

Ниже приведены выдержки из представленных протоколов испытаний:

«Правильность результатов определения белка мочи с использование набора «Юни-Тест-БМ» определялась на контрольных материалах производства фирмы «Био-Рад» и «Биосистемс» с содержание белка в диапазоне от 0,04 г/л до 2,88 г/л. Отклонение от установленных значений не превышало 8,3% , при максимально допустимом отклонении для белка мочи – до 23%, что свидетельствует о том, что испытанный набор работает правильно. Воспроизводимость результатов определения в одной серии (n=10) была достаточно высокой – коэффициент вариации находился в пределах 3,6 – 7,0%. Данные воспроизводимости результатов изо дня в день (n=20, КВ = 7 – 12%) свидетельствуют о том, что набор реагентов для определения содержания белка мочи «Юни-Тест-БМ» работает стабильно не только в течение одного дня, но и при соблюдении условий хранения в течение всего указанного срока годности» (проф. Титов В.Н.).

«В ходе испытаний проверялись следующие аналитические характеристики набора: чувствительность, линейность, «открытие», правильность, воспроизводимость, корреляция с наборами других производителей. Для проверки чувствительности использовалась моча с содержанием белка 0,06 г/л. Средняя из пяти определений (0,066, 0,064, 0,058 , 0,056, 0,059) составила 0,061 г/л. Для проверки линейности использовалась моча с содержанием белка 2,5 г/л. Были приготовлены разведения в 4, 10, 20 и 35 раз. В каждом из полученных образцов проведено по пять определений концентрации белка. Во всех случаях отклонение от линейности не превышало 5%. Для проведения теста на «открытие» были смешаны в равных соотношениях пробы мочи с концентрацией белка 0,208 г/л и 0,645 г/л. Средняя из пяти определений в полученной пробе составила 0,436 г/л, ожидаемая концентрация — 0,427 г/л. Отклонение-2,1 %. Правильность проверялась путем измерения контрольной мочи Lyphochek нормальной и патологической фирмы «BIO-RAD», при этом средние значения из пяти определений составили 0,166 г/л и 0,603 г/л при паспортных значениях 0,15 (0,11 — 0,19) г/л и 0,56 (0,48 — 0,64) г/л, соответственно. Воспроизводимость в серии оценивалась по 10 измерениям одной и той же мочи с относительно низкой (0,083 г/л) и высокой (0,653 г/л) концентрацией белка. Коэффициент вариации составил 4,16 % и 1,8 %, соответственно. Для оценки корреляции между наборами разных производителей было проведено определение белка в тридцати пробах мочи пациентов испытуемым набором и набором фирмы «Вектор Бест». Коэффициент корреляции между наборами составил 0,999 %. Время выхода оптической плотности раствора после добавления анализируемой пробы на устойчивые показатели – 15 мин при t = + 25оС. Окраска проб оставалась стабильной в течение всего периода испытаний при хранении в холодильнике. Таким образом, все проверяемые в ходе испытаний аналитические и технические характеристики набора соответствуют изложенным в инструкции к набору. Набор может быть рекомендован для практического применения в клинико-диагностических лабораторях» (проф. Михайлов Ю.Е.).

«Воспроизводимость и правильность результатов, а также сопоставимость результатов, полученных с помощью различных методов (набор реагентов других производителей – “Total Protein US FS” (Diasis, Германия) удовлетворяют заявленным разработчиком требованиям и соответствуют требованиям точности измерений в лабораторной практике (согласно приказу №45 МЗ РФ от 07.02.2000г.). Испытанный прибор в применении прост, удобен для анализа и позволяет определять микроконцентрации белка в моче, определяемые нормой. Инструкция по применению содержит всю необходимую информацию в ясной и доступной пользователю форме. Заключение: Набор реагентов для определения белка в моче «Юни-Тест-БМ» соответствует требованиям медицинской и лабораторной практики и может быть рекомендован к промышленному производству с использованием в медицинских учреждениях» (д.м.н. Ермакова И.П.).

«Проведенные медицинские испытания показали, что набор реагентов для определения концентрации белка в моче пирогаллоловым методом «Юни-Тест-БМ» удобен в работе. Рабочие реагенты сохраняли стабильность в течение всего указанного срока. Аналитические характеристики соответствуют приведенным в инструкции к набору. Набор удобен для применения, его комплектность позволяет использовать в лабораториях разной мощности» (доцент кафедры клинической лабораторной диагностики РМАПО, к.м.н. Ройтман А.П.).

Теги:

Анализ мочи:

16.05.2019

До недавнего времени определение концентрации белка в суточной моче считалось «золотым стандартом» в диагностике протеинурии. И это имело под собой очень серьезное основание. Дело в том, что качественный и количественный состав мочи в течение суток значительно изменяется, а определение белка в суточной моче позволяет нивелировать влияние величины диуреза на концентрацию белка в моче. Приведем пример: у пациента с величиной экскреции белка в 0,5г. в сутки концентрация белка в моче может варьироваться  от 1 г/л (при суточном диурезе 0,5л) до 0,2г/л (при суточном диурезе в 2,5л.).

Однако, сбор суточной мочи — очень сложный процесс даже для пациентов стационара, и он практически неосуществим для детей раннего возраста и пожилых пациентов. А как быть больницам скорой помощи, в которые ургентные пациенты поступают круглосуточно, и первый анализ мочи можно выполнить только из разовой порции, полученный в момент госпитализации?

Многолетние научные исследования по поиску альтернативы суточному анализу мочи показали, что корректно оценить почечную экскрецию белка без определения объема суточного диуреза позволяет расчет соотношения белок/креатинин.

Физиологическое обоснование этого подхода следующее: у одного и того же человека в стабильных условиях экскреция креатинина с мочой — величина относительно постоянная (количество креатинина, которое образуется организмом человека в течение суток является постоянным, креатинин свободно проходит через клубочковый фильтр и не реабсорбируется в почечных канальцах, т.о., с мочой в течение суток выделяется весь образовавшийся в организме креатинин), а его концентрация в моче зависит исключительно от объема диуреза, который в свою очередь зависит от объема потребления жидкости. Аналогично величина диуреза влияет и на концентрацию белка в моче, при этом отношение белка к креатинину остается постоянным при любом объеме диуреза. 

Приведем пример индивидуальных вариаций концентрации белка и креатинина в моче у одного из практически здоровых испытуемых. Утреннюю порцию мочи испытуемого исследовали в течение 7 дней. Исследования проводились с использованием аналитической системы: Анализатор белка и креатинина в моче URiСКАН-БК, набор реагентов Юни-Тест-БМ (для белка в моче) и набор реагентов Креатинин UTS (для определения креатинина в моче и сыворотке). Результаты представлены в Табл.1.

Таблица 1. Индивидуальные вариации концентрации белка и креатинина.

Как видно из представленных данных, разброс концентрации белка в моче более, чем 10 раз (от 0.013 до 0,166 г/л)! 13.09. испытуемый на ночь выпил 3 стакана воды, что существенно увеличило объем утреннего диуреза и концентрация белка в моче составила 0,013 г/л, а 19.09 было противоположная ситуация – жидкость перед сном не принималась, что привело к значительному концентрированию утренней порции мочи и увеличению концентрации белка почти в 13 раз (0,166 г/л). Аналогичная зависимость выявлена и для креатинина (концентрация креатинина изменилась в 6,4 раза), что свидетельствует о наличии общей причины таких существенных концентрационных вариаций исследованных аналитов. В данном случае это объем диуреза. Соотношение же белок/креатинин остается относительно постоянным – оно изменилось всего в 1.9 раза.

В многочисленных клинических исследованиях установлено, что величина протеин-креатининового соотношения в первой утренней порции мочи четко коррелирует с уровнем суточной протеинурии. Так, соотношение белок/креатинин более 3,0-3,5 г белка/г креатинина соответствует экскреции белка выше 3,0-3,5 г/сутки, менее 0,2 г белка/г креатинина – уровню ниже 0,2 г/сутки. Поэтому, во всех ныне действующих российских и зарубежных клинических рекомендациях при диагностике протеинурии рекомендовано определять соотношение общий белок/креатинин и альбумин/креатинин.

В норме значение соотношения общий белок/креатинин по разным источникам не превышает 0,15-0,2 г белка/креатинина, при тубулоинтерстициальных поражениях почек (нарушена реабсорбция) этот показатель находится в диапазоне от 0,2 г/г до 1,0 г/г, при гломерулярных заболеваниях (нарушена барьерная функция) превышает 1,0 г/г, а при тяжелой преэклампсии может достигать 5,0 г белка/г креатинина и более.

Более подробно о современных подходах к диагностике протеинурии читайте в статье: Диагностика протеинурии. В помощь практикующему врачу.  А.Н. Шибанов, О.А. Куриляк

Анализ мочи:

03.06.2009

Бондаренко В.А.1, Бондарь Т.П.2, Иванова В.Н.1, Карнаухова Н.В.1, Шибанов А.Н.3

1 Ставропольская государственная медицинская академия, кафедра клинической лабораторной диагностики, г. Ставрополь

2 Ставропольский государственный университет, Ставрополь

3 ЗАО «А/О Юнимед», г. Москва

Из архива журнала «Урология»

Для определения содержания белка в моче у больных с обменными нефропатиями в клинико-диагностических лабораториях (КДЛ) унифицирован метод с применением сульфосалициловой кислоты (ССК-метод) [3, 6, 11]. Широкое распространение в лабораторной практике получили методы «сухой химии» (тест-полоски, выпускаемые различными фирмами). Методы «сухой химии» являются полуколичественными и служат для быстрой оценки содержания белка в моче [3, 5].

Протеинурия – один из наиболее значимых симптомов, отражающих поражение органов мочевой системы, преимущественно почек.

Получаемые результаты при анализе концентрации белка в моче ССК-методом не удовлетворяют требованиям ЛПУ по точности и воспроизводимости [4, 10, 12, 13]. Это обусловлено многочисленными ограничениями метода, связанными с интерференцией разнообразных факторов: как особенностями исследуемого образца (присутствие в моче различных веществ, цвет, мутность, реакция рН мочи и др.), так и внешними факторами (условия реакции преципитации, встряски пробы, низкое качество рабочих реагентов, приготовленных в КДЛ «кустарным» способом и др.).

Полуколичественные анализы с помощью тест-полосок также не позволяют получать однозначные результаты, которые, кстати, не всегда совпадают с данными количественных методов [9, 15, 16].

По этим причинам выявление протеинурии у пациентов с обменной нефропатией представляет определенные трудности. Данное исследование актуально тем, что при обменных нефропатиях у детей микропротеинурия расценивается как патологическая, если она превышает 70-100 мг/сут [1, 8], а, как известно, малые концентрации белка не всегда выявляются при исследовании мочи, используемыми в настоящее время методами [3, 6].

В связи с вышеуказанным, целью настоящей работы явилось изучение эффективности применения недавно появившегося в России пирогаллолового метода (ПГК-метода) [4, 14] для выявления микропротеинурии у больных детей с обменной кристалло-кальциевой нефропатией и контроля за лечением.

Материалы и методы. Для решения поставленной задачи была обследована группа больных, находящихся на лечении в Детской краевой клинической больнице г. Ставрополь в отделении нефрологии. Исследование лабораторных показателей проводилось на базе клинико-диагностической лаборатории Детской краевой клинической больницы. Основные клинические симптомы: длительная стойкая кристаллурия, отягощенная родословная, а так же наличие транзиторного мочевого синдрома в виде микропротеинурии, абактериальной лейкоцитурии, микрогематурии и повышение уровня суточной экскреции уратов и оксалатов, а у части пациентов – повышение уровня мочевой и щавелевой кислот в сыворотке крови. Все больные предъявляли жалобы: дизурические расстройства, боли в животе, и у девочек – вульвиты и вульвовагиниты.

В результате, на основании жалоб, клинических проявлений и изменений лабораторных показателей установлен клинический диагноз: обменная нефропатия, кристалло-кальциевая кристаллурия [2, 7].

Возраст обследованных больных от 5 лет до 12 лет. Длительность болезни более 3-х лет. Контрольную группу составили 20 здоровых человек.

При макроскопическом исследовании мочи у всех больных отмечали неполное или полное помутнение мочи, рН слабокислая или кислая, а при микроскопии осадка обнаруживали оксалаты, эпизодически ураты, кристаллы мочевой кислоты, гиалиновые цилиндры, абактериальную лейкоцитурию, эпизодическую эритроцитурию.

Определение концентрации белка в моче проводилось одновременно тремя методами: ССК-методом, ПГК-методом (набор реагентов «ЮНИ-ТЕСТ-БМ» компании ЗАО «А/О Юнимед», Россия) и методами «сухой химии» (тест-полоски «Пентафан» фирмы «Лахема», Чехия).

При использовании тест-полосок построения калибровочного графика не требовалось. Оценка результатов проводилась с использованием шкалы референтных значений. Основной определяемый компонент — альбумин [3, 5].

При применении ССК-метод [11] построение калибровочной зависимости является обязательным. В нашем исследовании линейность измерения сохранялась до 1 г/л.

Построения калибровочной прямой при проведении исследования по стандартной методике ПГК-методом не требуется[4, 14], так как используются заранее предложенные расчетные коэффициенты для спектрофотометрии. Линейность исследования сохранялась до 2,5 г/л.

Измерение проводились на фотометре КФК-3 (ОАО «Загорский оптико-механический завод», Россия), с использованием длины волны 590 нм (для ССК-метода) и 600 нм (для ПГК-метода), согласно методическим указаниям.

Из 43 обработанных проб, наличие белка выявили у 26 больных тест-полосками, у 30 – ССК-методом и у 40 – ПГК-методом. У троих пациентов наличие белка не определялось ни одним из перечисленных методов. Определяемые концентрации белка ССК-методом от 0,022 до 0,6 г/л, ПГК-методом – от 0,003 до 1,9 г/л.

В результате проведенного исследования установлено, что белок в моче ССК-методом не выявлен у 30% пациентов (рис. 1), а ПГК-методом – у 7% пациентов (рис. 2). Полученные данные позволяют считать, что у значительной части больных не выявляются невысокие концентрации белка в разовых порциях мочи, а, значит, не устанавливается диагноз нефропатии и, как следствие, не проводится соответствующая диагнозу реабилитация.

Рис. 1. Результаты определения концентрации общего белка в моче ССК-методом.

Рис. 2. Результаты определения концентрации общего белка в моче ПГК-методом.

Микропротеинурия обнаружена ССК-методом у 16% больных, а ПГК-методом – у 37% пациентов.

Всем больным назначалась стандартная схема лечения. Диета с исключением оксалогенных продуктов, картофельно-капустный стол по 10-14 дней в месяце. Дополнительное питье по 20-25 мл/кг массы тела в сутки в зависимости от возраста. Курсы витаминов группы В6, В15, А, Е (аевит), ксидифон, димефосфон, цистон в возрастной дозировке по 2-3 недели ежеквартально. Фитотерапия – отвар овса, льна, спорыша. Лечение проводилось от 6 до 12 месяцев.

После проведенного лечения отмечали отсутствие характерных для данного заболевания клинических симптомов, в том числе у детей, микропротеинурия у которых не выявлялась сульфосалициловым методом, и инволюцию лабораторных показателей.

В частности, при макроскопическом исследовании отмечали: прозрачность мочи – полная, рН мочи слабокислая и нейтральная, а при микроскопии осадка отмечали отсутствие солей, цилиндров, содержание лейкоцитов и эритроцитов в пределах нормы. При определении концентрации белка в моче ПГК-методом установили полное его отсутствие у 86% пациентов, концентрация белка ниже следовых значений – у 9%, и выше 0,033 г/л – у 5%.

Таким образом, при первичном обследовании протеинурия разной степени выраженности установлена ПГК-методом у 93% больных, а после проведенного лечения наличие белка в моче отмечали лишь у 14% детей данной группы (см. рис. 3).

Рис. 3. Наличие протеинурии у больных до и после лечения.

Выводы: ПГК-метод является высокочувствительным тестом для определения протеинурии. Он позволяет выявлять наличие микропротеинурии у больных с обменной нефропатией.

Использование других методов определения концентрации белка в моче у больных с данной патологией имеет серьезные ограничения. В частности, при микропротеинурии применение диагностических полосок зачастую неэффективно, так как их чувствительность не позволяет определять концентрации белка в моче ниже 0,1 г/л. При обменной нефропатии в моче присутствуют оксалаты, ураты, соли мочевой кислоты, которые способны оказывать влияние на результаты, полученные при анализе ССК-методом. При анализе ПГК-методом влияние матрикса мочи не отмечено.

Использование ПГК-метода не только позволяет выявить группу больных с микропротеинурией, но и дает возможность контролировать их лечение и дальнейшую динамику появления незначительных концентраций белка в моче у данной категории детей. Определяя микропротеинурию более чувствительным методом, мы можем диагностировать обменную нефропатию на более ранних стадиях, а значит — улучшать эффективность лечебно-профилактических мер.

Доказана эффективность данной схемы лечения у больных с обменной нефропатией, оксалатно-кальциевой кристаллурией.

Литература:

• Бурцев В.И., Турчина Л.П. Протеинурия. // Клин. мед. – 1998. – № 8. – С.48-52.
• Вельтищев Ю.А., Юрьева Э.А., Титов Г.Н., Башляева З.А. Биохимическое исследование мочи у детей. Методические рекомендации // М. – 1979. – C.47.
• Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии // СПб: «Интермедика». – 1998. – Том № 1. – С.164.
• Ким Ю.В., Потехин О.Е., Токар М.И., Шибанов А.Н. // Лаб. мед. – 2003. – № 6. – C.94-98.
• Козлов А.В., Слепышева В.В. Методы определения белка в моче: возможности и перспективы // Сборник трудов VII ежегод. СПб нефрол. семинара. – СПб: ТНА. – 1999. – C.17-28.
• Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике // М.: «Медицина». – 1987. – С.48-50.
• Наумова В.И., Мызина Н.В., Сергеева Т.В., Вельтищев Ю.А., Юрьева Э.А., Канатбаева А.Т., Машкеев А.К., Хусаинова Ш.Н. Лабораторные методы диагностики заболеваний почек у детей: – Методические рекомендации // М. – 1978. – С.28.
• Папаян А.В., Савченкова Н.Д. Клиническая нефрология детского возраста // СПб. – 1997. – С.60-69.
• Beer J.H., Vogt A., Neftel K., Cottagnoud P. // BMJ. – 1996. – Vol. 313 (7048). – P.25.
• Chambers R.E., Bullock D.G., Whicher J.T. // Ann. Clin. Biochem. – 1991. – Vol. 28 (Pt 5). – P.467-473.
• Kingsbury F.B., Clark C.P., Williams G., Post A.L. // J. Lab. Clin. Med. – 1926. – Vol. 11. – P.981-989.
• Nakamura J., Yakata M. // Clin. Chem. – 1982. – Vol. 28(11). – P.2294-2296.
• Nishi H.H., Elin R.J. // Clin. Chem. – 1985. – Vol. 31. – P.1377-1380.
• Watanabe N., Kamei S., Ohkubo A., Yamanaka M., Ohsawa S., Makino K., Tokuda K. // Clin. Chem. – 1986. – Vol. 32 (8). – P.1551-1554.
• Wilson P., Clarke F.V., Cutler R.R., Merrett J.O., Jenks P. // BMJ. – 1996. – Vol. 313 (7063). – P.1009-1010.
• Yosselson-Superstine S., Sinai Y. // J. Clin. Chem. Clin. Biochem. – 1986. – Vol. 24 (1). – P.103-106.

Теги: