Алк в моче норма
АЛК АГАТ
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения 5-аминолевулиновой кислоты в моче
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для качественного и количественного определения 5-аминолевулиновой кислоты (АЛК) в моче в клинико-диагностических и биохимических лабораториях. АЛК является важным диагностическим маркером отравления свинцом. Кроме того, значительное повышение уровня АЛК в моче может наблюдаться при патологических процессах, связанных с нарушением порфиринового обмена (порфириях). Набор рассчитан на проведение 100 качественных или 15 количественных определений.
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
АЛК реагирует с метилацетоацетатом при нагревании с образованием пиролла, который селективно экстрагируется этилацетатом. При взаимодействии пиролла в сильнокислой среде с п-диметиламинобензальдегидом (реактив Эрлиха) образуется окрашенное в красный цвет соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации АЛК и измеряется фотометрически при длине волны 553 нм (540-560 нм).
СОСТАВ НАБОРА
1. п-Диметиламинобензальдегид (2 г) — 1 флакон;
2. Смесь кислот (уксусная кислота, 14 моль/л, хлорная кислота 0,92 моль/л) — 1 флакон (100 мл);
3. Буфер (ацетат натрия-уксусная кислота 2,0 моль/л, рН 4,6) — 1 флакон (50 мл);
4. Метилацетоацетат — 1 флакон (10 мл);
5. Экстрагент (этилацетат) — 2 флакона (по 75 мл);
6. Калибровочный раствор АЛК, 30 мг/л — 1 флакон (5 мл).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Чувствительность определения не более 2 мг/л.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
При работе с данным набором необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (М., 1981г.). Операцию инкубации пробирок с образцами в кипящей водяной бане следует проводить в вытяжном шкафу. Реактив Эрлиха содержит уксусную и хлорную кислоты — едкие вещества. В случае попадания раствора на кожу и слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством проточной воды. Пипетирование per os категорически запрещается. При попадании внутрь следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
ОБОРУДОВАНИЕ:
— Спектрофотометр, длина волны 553 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 540-560 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
— водяная баня, обеспечивающая температуру +100±1° С;
— центрифуга лабораторная на 3000 об/мин;
— секундомер; — вода дистиллированная;
— пипетки, позволяющие отбирать соответствующие объемы жидкости;
— шейкер;
— пробирки центрифужные вместимостью 5-10 мл.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
Реактив Эрлиха: Содержимое флакона с п-диметиламинобензальдегидом количественно перенести во флакон с раствором кислот и растворить при перемешивании.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
1. Качественное определение АЛК.
Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 1.
Таблица 1
Содержимое пробирок тщательно перемешать, пробирки закрыть колпачками из алюминиевой фольги и поместить точно на 10 минут в кипящую водяную баню. Затем пробирки быстро охладить в потоке холодной воды. В каждую пробирку прилить по 1,5 мл экстрагента (этилацетата). Пробирки плотно укупорить и перемешать на шейкере в течение не менее 30 сек. или встряхнуть вручную 50 раз. Затем каждую пробирку центрифугировать 5 минут при 3000 об/мин (1800 g). Отобрать 1,0 мл экстракта (верхнего слоя) и перенести в чистую пробирку. Прибавить 1,0 мл реактива Эрлиха и тщательно перемешать. Реакцию на АЛК следует считать положительной, если через 10 минут после добавления реактива Эрлиха произошло изменение окраски (розовое или красное окрашивание) по сравнению с холостой (желто-бурая окраска) и калибровочной пробами. Калибровочная проба, с учетом разведения, соответствует 6 мг/л АЛК. В случае положительной реакции рекомендуется провести количественное определение АЛК.
2. Количественное определение АЛК.
Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах, указанных в таблице 2.
Таблица 2
Содержимое пробирок тщательно перемешать, пробирки закрыть колпачками из алюминиевой фольги и поместить точно на 10 минут в кипящую водяную баню. Затем пробирки быстро охладить в потоке холодной воды. В каждую пробирку прилить по 3,0 мл экстрагента (этилацетата). Пробирки плотно укупорить и перемешать на шейкере в течение не менее 30 сек. или встряхнуть вручную 50 раз. Затем каждую пробирку центрифугировать 5 мин при 3000 об/мин (1800 g). Отобрать 2,0 мл экстракта (верхнего слоя) и перенести в чистую пробирку. Прибавить 2,0 мл реактива Эрлиха, содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18-25° С) в течение 10 минут.
Измерить величины оптических плотностей:
— пробы C против пробы A — ( ECA)
— пробы D против пробы B — ( EDB)
— пробы E против пробы B — ( EEB)
при 553 (540-560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм.
Окраска устойчива в течение 1 часа.
Концентрацию АЛК рассчитать по формуле (1):
EEB — ECA
C = ————————- x 6,
EEB — EDB
где: С — концентрация АЛК в опытной пробе, мг/л;
6 — концентрация АЛК в калибровочном растворе, с учетом разведения, мг/л.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор следует хранить в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2-25° С в течение всего срока годности. Срок годности — 2 года. Для качественного определения АЛК реактив Эрлиха устойчив при хранении в плотно укупоренном виде при температуре +2-8° С не более 3 суток. Для количественного определения использовать свежеприготовленный реактив Эрлиха. Буфер, Метилацетоацетат и Экстрагент после вскрытия флаконов могут храниться в укупоренном виде при температуре +2-25 °С в течение 1 года, но не более срока годности набора. Калибратор после вскрытия флакона может храниться в плотно укупоренном виде при температуре +2-8° С в течение 1 года, но не более срока годности набора.
По вопросам, касающимся приобретения наборов и их качества, просим обращаться по адресу: 105173, г. Москва, ул. Западная, д. 2, ООО «Агат-Мед». Телефон для справок: (495) 777-41-92.
Источник
Свинец в моче
Общая информация об исследовании
Среди тяжелых токсичных металлов свинец является наиболее частой причиной отравлений. Он широко используется в промышленности и в небольшом количестве содержится в окружающей среде. В течение многих лет он использовался при изготовлении красок, водопроводных труб, пестицидов и консервных банок. Его содержание повышено в старых обветшалых домах и на территориях, окружающих многие промышленные предприятия.
Свинец попадает в организм через органы дыхания или абсорбируется в желудочно-кишечном тракте. Степень абсорбции зависит от размера частиц и химической формы свинца. В организме взрослого человека из кишечника всасывается 6-10 % этого металла и совсем небольшое его количество удерживается в тканях. В связи с интенсивным ростом и высокой степенью абсорбции в кишечнике ребенка всасывается 40-50 % поступившего свинца, из которых 20-25 % накапливается в тканях. Выводится из организма он с мочой и калом.
Даже в небольших количествах свинец негативно воздействует на многие органы и ткани (при этом симптомы интоксикации могут отсутствовать). В организме человека он угнетает синтез гемоглобина и приводит к микроцитарной анемии при нормальном уровне железа. К тому же молекулы свинца нарушают проведение импульса по нервному волокну.
Степень вреда и выраженности симптомов зависит от дозы металла и длительности его воздействия, возраста человека, его нутритивного статуса, наличия сопутствующих заболеваний и патологий. Например, у людей с недостаточным питанием и с железодефицитом абсорбция свинца из кишечника значительно повышена. Наиболее восприимчивы к токсическому воздействию этого металла дети и беременные. Свинец способен проникать через плаценту от матери в организм плода, что не только может влиять на формирование органов и тканей ребенка, но и грозит невынашиванием или преждевременными родами.
Основной «мишенью» свинца является центральная нервная система. У детей в связи с несовершенным развитием гематоэнцефалического барьера он проникает в нервную ткань значительно быстрее, чем у взрослых. Свинцовая интоксикация влияет на формирование слуха и зрения, вызывает задержку развития, стойкие нарушения нервно-психических функций и поведения, снижение умственных способностей.
Свинцовое отравление у взрослых чаще происходит при профессиональном контакте с этим металлом или при использовании в быту материалов, содержащих его. Вероятность отравиться высока у работников заводов, авторемонтников, изготовителей свинцовых покрытий, шахтеров, сварщиков, строителей, сталеваров, литейщиков. Также интоксикация возможна при изготовлении свинцовых пуль и рыболовных грузил, витражей и керамики, при паяльных работах, рисовании с использованием красок, содержащих свинец.
Свинец накапливается преимущественно в костях и очень медленно выводится из организма. Острое отравление встречается редко и проявляется энцефалопатией, сильными болями в животе, рвотой, нарушением стула, судорогами и в некоторых случаях заканчивается комой и даже смертью. Хроническое воздействие свинца может длительно протекать бессимптомно. Его признаками бывают бледно-серый цвет кожи, темная кайма по краям десен, слабость, тошнота, утомляемость, потеря массы тела, анемия, головные боли, рези в области желудка, нарушения функции почек, нервной и половой систем. Полное выздоровление возможно только при легких степенях отравления.
Концентрация свинца в моче коррелирует с его содержанием в организме. Экскреция свинца с мочой усиливается при эффективной антидотной терапии на начальных этапах лечения.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики отравления свинцом.
- Для дифференциальной диагностики вероятных причин отравления химическими веществами (с одновременным определением уровня других токсических металлов).
- Для мониторинга избыточного воздействия свинца на организм человека в условиях производства.
- Чтобы оценить эффективность лечения сатурнизма.
Когда назначается исследование?
- При симптомах отравления свинцом.
- При профилактическом обследовании детей и взрослых.
- При обследовании членов семьи человека, работающего в условиях повышенного содержания свинца (в связи с возможностью поступления в дом свинца с загрязненной одежды).
- При обследовании людей, работающих в условиях воздействия свинца.
- Во время и после антидотной терапии отравления.
Источник
Анализ мочи на органические кислоты
[06-193] Анализ мочи на органические кислоты
3550 руб.
Определение концентрации органических кислот в моче, используемое для диагностики врождённых органических ацидемий (ацидурий).
Состав комплекса:
• Гликолиевая кислота • Глутаровая кислота • Пировиноградная кислота • Адипиновая кислота • Гиппуровая кислота • 3-гидроксимасляная кислота • 3-гидрокси-3-метилглутаровая кислота • 4-гидроксифенилпировиноградная кислота • 4-гидроксифенилуксусная кислота • Метилмалоновая кислота • Глиоксиловая кислота • Этилмалоновая кислота • 2-гидроксиизокапроновая кислота • Мевалоновая кислота • Фенилпировиноградная кислота • Субериновая кислота • 2-этил-3-гидроксимасляная кислота • 3-метилглутаровая кислота • Себациновая кислота • Сукциновая кислота • Гомогентизиновая кислота • N-ацетиласпартиковая кислота • Глицериновая кислота
Синонимы русские
Диагностика органических ацидемий (ацидурий).
Синонимы английские
Organic acids, Urine.
Метод исследования
Газовая хроматография-масс-спектрометрия (ГХ-МС).
Единицы измерения
Ммоль/моль креат. (миллимоль на моль креатинина).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Среднюю порцию утренней мочи
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
- Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
Общая информация об исследовании
Органические кислоты — это органические вещества, которые обладают свойствами кислот. Они образуются под действием ферментов в результате метаболизма белков, углеводов и жиров и различаются по структуре и составу. При нарушении функции этих ферментов органические кислоты накапливаются в крови и в тканях. Чаще нарушение функции ферментов носит врождённый характер. В этом случае говорят о врождённых органических ацидемиях (ацидуриях). Существует огромное количество органических кислот и, следовательно, многообразие врождённых ацидемий. Наиболее часто встречаются метилмалоновая, пропионовая и изовалериановая ацидемии, однако существуют и другие, более редкие варианты.
Врождённые ацидемии имеют много общего. Так, большинство врождённых ацидемий — это аутосомно-рециссивные заболевания, которые проявляются в младенчестве или в раннем детстве. Вне зависимости от природы органической кислоты, ее избыток оказывает отрицательное воздействие на головной мозг. Это объясняет, почему наиболее часто врождённые ацидемии проявляются в виде нарушений со стороны нервной системы: задержки умственного развития, судорог, гипо/гипертонуса или дистонии, атаксии, энцефалопатии, задержки речевого развития, нарушений зрения, экстрапирамидных симптомов и других. К другим признакам врождённых ацидемий относятся метаболический ацидоз, гипогликемия, тошнота/рвота, кожные высыпания, гепатомегалия, кетоацидоз или кетонурия и признаки дисморфогенеза. Главная опасность врождённых ацидемий состоит в том, что при их несвоевременной коррекции эти изменения необратимы, поэтому так важна ранняя диагностика и лечение заболеваний этой группы. Основа диагностики врождённых ацидемий — это лабораторные анализы. Так как все органические ацидемии похожи друг на друга, для их диагностики проводят комплексный анализ, в котором определяют концентрацию сразу всех органических кислот.
Лабораторная диагностика ацидемий не очень проста. Это связано с тем, что в крови одновременно содержится огромное количество органических кислот, при этом транзиторное повышение их концентрации может наблюдаться в результате приема лекарственных средств, изменений в диете или даже в составе микрофлоры кишечника. Одним из лучших методов диагностики врождённых ацидемий является газовая хроматография-масс-спектрометрия. Этот метод позволяет быстро разделить кислоты между собой и определить природу органической кислоты.
Анализ на органические кислоты проводят при наличии у ребенка: 1. Специфического, странного запаха мочи. 2. Метаболического ацидоза, транзиторного или постоянного, при повышенном или нормальном анионном интервале. 3. Упорной рвоты, особенно если при этом наблюдается метаболический ацидоз. 4. Острого заболевания в младенческом возрасте, особенно если при этом наблюдается гипераммониемия и метаболический ацидоз. 5. Прогрессирующих экстрапирамидных симптомов. 6. Синдрома Рея, особенно при возникновении в младенчестве, при наличии повторных приступов и отягощенного наследственного анамнеза по этому заболеванию. 7. Любого наследственного заболевания с неустановленной причиной. Учитывая необратимые последствия, к которым могут привести органические ацидемии, в некоторых странах и семьях предпочитают проводить профилактический (скрининговый) анализ на органические кислоты всем новорождённым детям.
Для диагностики врождённых ацидемий можно использовать как кровь, так и мочу. Следует отметить, что органические кислоты практически не реабсорбируются в почечных канальцах, поэтому их концентрация в моче выше, чем в крови, и их проще определить в моче. Анализ обеих биологических жидкостей (крови и мочи) позволяют получить более точный результат.
Метод определения органических кислот с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии — один из наиболее точных методов, однако ложноположительные и ложноотрицательные результаты анализа все же возможны. Поэтому результаты теста следует интерпретировать с учетом всех анамнестических, клинических и других лабораторных данных.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики врождённых органических ацидемий (ацидурий).
Когда назначается исследование?
При наличии:
- специфического, странного запаха мочи;
- метаболического ацидоза, транзиторного или постоянного, при повышенном или нормальном анионном интервале;
- упорной рвоты, особенно если при этом наблюдается метаболический ацидоз;
- острого заболевания в младенческом возрасте, особенно если при этом наблюдается гипераммониемия и метаболический ацидоз;
- прогрессирующих экстрапирамидных симптомов;
- синдрома Рея, особенно при возникновении в младенчестве, при наличии повторных приступов и отягощенного наследственного анамнеза по этому заболеванию;
- любого наследственного заболевания с неустановленной причиной;
- при профилактическом (скрининговом) обследовании новорождённого.
Что означают результаты?
Референсные значения
Компонент | Возраст | Референсные значения, ммоль/моль креат. |
Гликолиевая кислота | 0-35 дн. | 1-40 |
35 дн. — 5 лет | 0,2-198 | |
5-18 лет | 43-172 | |
Больше 18 лет | 18-55 | |
Глутаровая кислота | 0-35 дн. | 0-3 |
35 дн. — 5 лет | 0-5.3 | |
5-18 лет | 0-3.8 | |
Больше 18 лет | 0,6-2,6 | |
Пировиноградная кислота | 0-35 дн. | 4,5-130 |
35 дн. — 5 лет | 5,1-22,6 | |
5-18 лет | 3,5-17,3 | |
Больше 18 лет | 2,6-7,9 | |
Адипиновая кислота | 0-35 дн. | 0-32 |
35 дн. — 5 лет | 0-34.3 | |
5-18 лет | 0-5.3 | |
Больше 18 лет | 0.8-35 | |
Гиппуровая кислота | 0-35 дн. | 2-122 |
35 дн. — 5 лет | 119-1390 | |
5-18 лет | 58-746 | |
Больше 18 лет | 170-391 | |
3-Гидроксимасляная кислота | 0-35 дн. | 0-19 |
35 дн. — 5 лет | 10-36 | |
5-18 лет | 0-20 | |
Больше 18 лет | ||
3-Гидрокси-3-Метилглутаровая кислота | 0-35 дн. | 15-43 |
35 дн. — 5 лет | 6.2-49.7 | |
5-18 лет | 0-28 | |
Больше 18 лет | 0-10 | |
4-Гидроксифенилпировиноградная к-та | 0-35 дн. | 0-74 |
35 дн. — 5 лет | 0-0.4 | |
5-18 лет | 0-0.3 | |
Больше 18 лет | ||
4-Гидроксифенилуксусная кислота | 0-35 дн. | 3-240 |
35 дн. — 5 лет | 12.3-174 | |
5-18 лет | 7.4-30.1 | |
Больше 18 лет | 3.5-22 | |
Метилмалоновая кислота | 0-35 дн. | 0-5 |
35 дн. — 5 лет | ||
Больше 5 лет | ||
Глиоксиловая кислота | 0-35 дн. | 0-20 |
35 дн. — 5 лет | 0.29-15.9 | |
5-18 лет | 0.2-5.7 | |
Больше 18 лет | ||
Этилмалоновая кислота | 0-35 дн. | 0-6.5 |
35 дн. — 5 лет | 1.7-14.6 | |
5-18 лет | 0-8.4 | |
Больше 18 лет | 0.4-4.2 | |
2-Гидроксиизокапроновая кислота | 0-35 дн. | 0-5 |
35 дн. — 5 лет | ||
Больше 5 лет | ||
Мевалоновая кислота | 0-35 дн. | 0.3-0.4 |
35 дн. — 5 лет | 0.1-0.3 | |
5-18 лет | 0.1-0.2 | |
Больше 18 лет | 0.1-0.2 | |
Фенилпировиноградная кислота | 0-35 дн. | 0-15.5 |
35 дн. — 5 лет | ||
Больше 5 лет | ||
Субериновая кислота | 0-35 дн. | 0-20 |
35 дн. — 5 лет | 0-10.1 | |
5-18 лет | 0-8.8 | |
Больше 18 лет | 0-2.9 | |
2-этил-3-гидроксимасляная кислота | 0-35 дн. | 0-12 |
35 дн. — 5 лет | 0-19.9 | |
5-18 лет | 0-19.8 | |
Больше 18 лет | ||
3-метилглутаровая кислота | 0-5 лет | |
Больше 5 лет | ||
Себациновая кислота | 0-35 дн. | 0-57 |
35 дн. — 5 лет | 0-1.4 | |
5-18 лет | 0-1.5 | |
Больше 18 лет | ||
Сукциновая кислота | 0-35 дн. | 13-125 |
35 дн. — 5 лет | 7.6-79.2 | |
5-18 лет | 4.9-81.3 | |
Больше 18 лет | 0.5-16 | |
Гомогентизиновая кислота | 0-5 лет | |
Больше 5 лет | ||
N-ацетиласпартиковая кислота | 0-35 дн. | 5-34 |
35 дн. — 5 лет | 7-40.8 | |
5-18 лет | 6-21.6 | |
Больше 18 лет | ||
Глицериновая кислота | 0-35 дн. | 0.2-40.5 |
35 дн. — 5 лет | 4.2-32.2 | |
5-18 лет | 2.6-28.2 | |
Больше 18 лет | 0.2-6 |
Что может влиять на результат?
- Особенности диеты;
- прием некоторых лекарственных средств.
Важные замечания
- Результаты теста следует интерпретировать с учетом всех анамнестических, клинических и других лабораторных данных;
- для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту.
Также рекомендуется
[06-192] Анализ крови на органические кислоты
[06-224] Расширенный анализ мочи на органические кислоты (60 показателей)
Кто назначает исследование?
Педиатр, неонатолог.
Литература
- Narayanan MP, Kannan V, Vinayan KP, Vasudevan DM. Diagnosis of major organic acidurias in children: two years experience at a tertiary care centre. Indian J Clin Biochem. 2011 Oct;26(4):347-53. Epub 2011 Feb 1.
- Goodman SI. An duction to gas chromatography-mass spectrometry and the inherited organic acidemias. Am J Hum Genet. 1980 Nov;32(6):781-92.
Источник